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血液基因组 DNA 提取试剂盒(快速型)

血液基因组 DNA 提取试剂盒(快速型)

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血液基因组 DNA 提取试剂盒(快速型):TM Blood Genomic DNA Extraction Kit 采用独特的疏水膜技术,彻底去除全血中蛋白和大部分 RNA 等各种干扰物,提取高纯度的 DNA。试剂盒采用独特的缓冲统,适用于多种不同类型的血液,同样适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清和其它无细胞体液中提取病毒 DNA。

  • 产品描述

血液基因组 DNA 提取试剂盒(快速型)

Blood Genomic DNA Extraction Kit

(适合从 50-200 μl 血液中提取基因组 DNA) 

 

血液基因组 DNA 提取试剂盒(快速型)

试剂盒组成:50 (50 次)

储存条件:本试剂盒在室温(15-25 ℃)下可保存一年。

产品特点:

TM Blood Genomic DNA Extraction Kit 采用独特的疏水膜技术,彻底去除全血中蛋白和大部分 RNA 等各种干扰物,提取高纯度的 DNA。试剂盒采用独特的缓冲统,适用于多种不同类型的血液,同样适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清和其它无细胞体液中提取病毒 DNA。

注意事项:

1.实验前准备工作:详细阅读该手册熟悉各步骤,并准备好所有的试剂盒组分、1.5 ml 和 2 ml 灭菌离心管、以及 37 ℃和 65 ℃的温浴条件。

2.KBL1 和 KW1 在低温时可能产生混浊或沉淀,在 37-65 ℃温浴片刻即可。

3.Buffer KW 第一次使用前请按瓶上标签加入 50 ml 无水或 95%乙醇, 并常温保存。每次使用后,请立即拧紧盖子。

操作步骤:

(一)平衡吸附柱

1.取一 KarrotenTM Mini Column 柱装在一个 2 ml 收集管上(已备)。加入 300 μl Buffer KB 平衡液至柱子内,室温 13 000 rpm 离心 1 min,使平衡液完全流过柱子。弃收集管中的滤液,将空柱套回收集管内。

注意:柱子不平衡,将导致 DNA 产率减少。

(二)样品处理

2.(1)按 100 μl 全血(适合各种抗凝剂,EDTA 较好)加入 100 μl 等体积的 KTL1,混匀,37℃温浴 5min。

(2) 加入 1000 μl KBL1,混匀 1min。

注意: 取样体积因物种不同有所差异。人血以 100-200 μl 为,小鼠以 50-100 μl 为。且当全血体积大于 200 μl 时,KBL1 体积按比例扩大。

(二)吸附

3.将混合液转移至已平衡的吸附柱内,室温 13 000 rpm 离心 30 s,使裂解液完全流过柱子。保留柱,弃去收集管中的过滤液,将柱重新放入收集管。

注意:如混合液体积过大,可分数次上柱,每次上样量不要超过 700 μl。

4.(可。┘尤 30 μl  浓度为 20-50 μg/ml 的RNase A  于柱的膜上,37 ℃放置 5-10 min。

注意:本试剂盒没有配备 RNase A 溶液。一般来说,这一步没有必要,因为本试剂盒的纯化柱对 RNA 没有吸附能力。如果实验要求不能残留微量RNA,可采用这一步处理。

(三) 漂洗

5.加入 700 μl Buffer KW1,室温 13 000 rpm 离心 30 s,弃去收集管中的过滤液,保留柱。

6.加入 700 μl Buffer KW,室温 13 000 rpm 以上离心 30 s,弃去收集管

中的过滤液,保留柱。

注意:Buffer KW 在首次使用之前必须加入 50 ml 无水乙醇,并置于室温下保存。

7.(可。 重复用 700 μl 70%乙醇(室温)洗涤柱子,室温 12 000 rpm

离心 1 min。

8.弃收集管中的滤液,将空柱套回 2 ml 收集管内。室温下,最高转速或 13 000 rpm 离心 2 min 以甩干柱子基质残余的液体。

注意:此步骤不可省,否则将导致乙醇残留于 DNA 中,影响后续反应。

(四)洗脱

9.把柱子装在一个新的 1.5 ml 离心管上,加入 30-50 μl 的 KE(可用灭菌的 TE 10 mM Tris-HCl,pH 8.0 或纯水代替,纯水可预先用 NaOH 调 pH 值至 8.0)于膜的中央,65 ℃放置 5-10 min,13 000 rpm 以上离心 1 min 以洗脱 DNA。(也可以将 KE 预热至 65℃,再加至膜上,可以减少放置时间至 1min)

注意:小心加 KE 到柱中吸附膜的中间部位,并确保液体将膜全部覆盖。

10.DNA 可保存于 4 ℃,若长时间保存,可冻存于-20 ℃。

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诊断血清:沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、大肠艾希氏菌诊断血清、霍乱弧菌诊断血清等。

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