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植物基因组DNA提取试剂盒

植物基因组DNA提取试剂盒

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植物基因组DNA提取试剂盒:TM Plant Genomic DNA Extraction Kit 采用独特的疏水膜技术,彻底去除植物组织细胞中蛋白和大部分 RNA 等各种干扰物,提取高纯度的DNA。试剂盒采用独特的缓冲系统,可从绝大多数不同类型的植物包括水稻,小麦,玉米,拟南芥和大豆等植物中快速提取基因组 DNA。一般情况下,100 mg 新鲜组织的基因组 DNA 产量可达 5-30 μg。

  • 产品描述

植物基因组 DNA 提取试剂盒

(Plant Genomic DNA Extraction Kit)

(适合从植物组织中提取基因组 DNA )

 

试剂盒组成    50 (50 次)

Plant Genomic DNA Extraction Ki 50

2 ml Collection Tube 50

Buffer KB (Column solution) 15 ml

Buffer KBL1 (Lysis solution) 2×30 ml

Buffer KW1(Wash solution ) 50 ml

Buffer KW (Wash solution ) 使用前加入 50 mL  无水 乙醇

Buffer KE (Elution solution) 15 ml

储存条件

本试剂盒在室温(15-25 ℃)下可保存一年。

产品特点:

TM Plant Genomic DNA Extraction Kit 采用独特的疏水膜技术,彻底去除植物组织细胞中蛋白和大部分 RNA 等各种干扰物,提取高纯度的DNA。试剂盒采用独特的缓冲系统,可从绝大多数不同类型的植物包括水稻,小麦,玉米,拟南芥和大豆等植物中快速提取基因组 DNA。一般情况下,100 mg 新鲜组织的基因组 DNA 产量可达 5-30 μg。本试剂盒不适宜从棉花,烟草,油菜等富含多酚多糖类植物中提取总 DNA,多酚多糖类植物的提取可选用其他试剂盒 。

注意事项:

1.实验前准备工作 :详细阅读该手册熟悉各步骤,并准备好所有的试剂盒组分、研钵、研棒、药匙、1.5 ml 和 2 ml 灭菌离心管以及 37 ℃和 65 ℃的温浴条件。

2.2. KBL1 和 KW1 在低温时可能产生混浊或沉淀,在 37-65 ℃温浴片刻即可。

3. Buffer KW 第一次使用前请按瓶上标签加入 50 ml 无水乙醇。每次使用后,请立即拧紧盖子。

操作步骤:

( 一) 平衡吸附柱

1. 取一TM Mini Column 柱装在一个 2 ml 收集管上(已备)。加入 300 μl Buffer KB 平衡液至柱子内,室温 13 000 rpm 离心 1 min,使平衡液完全流过柱子。弃收集管中的滤液,将空柱套回收集管内。

注意:柱子不平衡,将导致 DNA  产率减少。

( 二 )样品处理

2. 组织破碎:可根据不同样品研磨难易程度选择以下方法:

1)液氮研磨:将 50-100 mg 组织直接放入研钵,加入少量液氮,迅速研磨,再加少量液氮,再研磨,如此三次,将样品研成粉末。用药匙迅速将样品干粉按 100 mg 组织/1000 μl KBL1 的比例加入一新的 2 ml 离心管中。加入 KBL1 后,震荡混匀。室温 13 000 rpm 离心 2 min。

2)直接研磨:对于新鲜植物组织,将 50-100 mg 组织直接放入研钵,按 100 mg 组织/1000 μl KBL1 比例加入 KBL1,直接在 KBL1 中将样品研磨匀浆后,转入 1.5 ml 离心管) (推荐)。室温 13 000 rpm 离心 5 min。弃去沉淀,上清液待转移。

注意:

1 )的 上述的推荐体积为使用的 KBL1  的最小体积比例。 基因组DNA  的纯度取决于 KBL1  的体积和标本的量,理论上 KBL1  的体积越大,

样 本的量越少, DNA  质量越好!  不同的植物组织有不同的比例,请在正式实验前摸索。

2 )尽量使用新鲜样品,或者样品取得后立即直接保存于液氮或者

-70  ℃。

(三 )吸附

3.将上清液转移到平衡过的吸附柱内,室温 13 000 rpm 离心 30 s,使裂解液完全流过柱子。弃去收集管中的过滤液,把柱套回收集管中。

4.注意:

1 )室温太低可能造成 KBL1  混浊或沉淀,在 37  ℃ 温浴片刻即可。

2 )如上清液 体积过大,可以分成数次上柱,每次 不要超过 700 μl。

4. )(可。┘尤 30 μl 浓度为 20-50 μg/ml 的 RNase A 于柱的膜上,37 ℃放置 5-10 min。

注 意:本试剂盒没有配备 RNase A  溶液。一般来说,这一步没有必要,因对 为本试剂盒的纯化柱对 RNA  没有吸附能力。如果实验要求不能残留微量RNA ,可采用这一步处理 。

 ( 四 )  漂洗

5. 加入 700 μl Buffer KW1,室温 13 000 rpm 离心 30 s,弃去收集管中的过滤液,保留柱。

6. 加入 700 μl Buffer KW,室温 13 000 rpm 离心 30 s,弃去收集管中的过滤液,保留柱。 注意:Buffer KW  在首次使用之前必须加入 50 ml  无水或95% 乙醇,并置于室温下保存。

7.  (可。┲馗从 700 μl 70%乙醇(室温)洗涤柱子,室温 13 000 rpm离心 1 min。(注意:用 70%乙醇漂洗有利于提高 DNA 纯度)

8. 弃去收集管中的滤液,将空柱套回收集管内。室温下,13 000 rpm 离心 2 min 以甩干柱子基质残余的液体。

注意: 此步骤不可省,否则 将导致乙醇残留于 DNA  中 ,影响后续反应。

 ( 五) ) 洗 脱

9. 把柱子装在一个新的 1.5 ml 离心管上,加入 50 μl 的 KE(可用灭菌的 TE 10 mM Tris-HCl,pH 8.0 或纯水代替,纯水可预先用 NaOH 调 pH 值至 8.0),65 ℃放置 5-10 min,13 000 rpm 离心 1 min 以洗脱 DNA。 (也可以将 KE  预热至 65 ℃ ,再加至膜上,可以减少放置时间至 1min )注意:小心加 KE  到柱 中吸附膜的中间部位, 并 确保 液体 将膜全部覆盖。

10 .DNA 应保存于 4 ℃,若长时间保存,可冻存于-20 ℃。

本司部分DNA提取试剂盒,致电:020-8257 4011杨永汉

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总RNA提取试剂盒

 

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